核酸檢測PCR實驗
一、PCR實驗室為負壓實驗室,無潔凈度要求;現考慮用于新冠肺炎的核酸檢測實驗室,要求進一步提高,P2實驗室,P3用;全新風預處理凈化,單獨排風,防止交叉感染;
1、PCR 實驗室依據所使用的方法可分為試劑準備、標本制備、擴增、產物分析等三或四個區(qū)域。只是使用實時熒光PCR儀、HIV病毒載量測定儀的PCR實驗室,有上述前面三個區(qū)域即可。各區(qū)域應完全獨立分隔,不應有任何的空氣直通。
2、標準的PCR實驗室產物分析區(qū)或三個區(qū)域的最后一個區(qū)域(即擴增及產物分析區(qū)),空氣流向應由室外向室內,可通過在室內設置通風櫥、排風扇或其他排風系統達到空氣流由室外向室內流動的要求。
二、 PCR實驗室各區(qū)域儀器設備配備通常如下:
1、標準的PCR實驗室試劑準備區(qū): 儀器設備主要應有加樣器、冰箱、天平、低速離心機、混勻器、可移動紫外燈等??墒褂贸瑑艄ぷ髋_作為試劑配制操作臺面。
2、標準的PCR實驗室標本制備區(qū)儀器設備主要應有生物安全柜(最好為B2, 可避免提取核酸在柜內反復循環(huán),造成標本間交叉“污染”,出現假陽性結果。
此外還應配備加樣器、臺式高速離心機(冷凍及常溫)、臺式低速離心機、恒溫設備(水浴和干浴儀)、冰箱、混勻器和可移動紫外燈等。
3、標準的PCR實驗室擴增區(qū)主要儀器就是核酸擴增熱循環(huán)儀(PCR儀,實時熒光或普通的)。熱循環(huán)儀的電源應專用,并配備一個穩(wěn)壓電源或UPS,以防止由于電壓的波動對擴增測定的影響。此外,根據工作需要,還可配備加樣器、超凈臺等。
4、標準的PCR實驗室產物分析區(qū):本區(qū)所使用的儀器設備可能有加樣器、電泳儀(槽)、電轉印儀、雜交爐或雜交箱、水浴箱、DNA測序儀、酶標儀和洗板機等。在理想情況下,PCR實驗室試劑準備、標本制備、擴增三個區(qū)域可設置緩沖間。在緩沖間內,可設置正壓,使室內空氣不流向室外,室外空氣不流向室內。